作为RNA干扰手段的一种,小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)已经被用于验证目标基因、认知和调控细胞代谢途径,并作为一种绿色替代方案,赋予农作物以害虫抗性。但是,传统的siRNA递送方法——如病毒和农杆菌介导的siRNA递送,往往受限于植物物种范围,并会导致不受控制的DNA整合(到植物基因组)。
加州大学伯克利分校(UCLA)Markita P. Landry教授和杨培东教授团队在ACS期刊《Nano Letters》上发表了题为“Gold-Nanocluster-Mediated Delivery of siRNA to Intact Plant Cells for Efficient Gene Knockdown”的文章,介绍了一种金纳米簇介导的完整植物细胞siRNA递送,有效实现基因抑制的方案。
通过聚乙烯亚胺功能化后的金纳米簇 (PEI-AuNCs),可以通过植物细胞壁,保护siRNA免受核糖核酸酶(RNase)降解,从而将siRNA递送到完整植物细胞中,有效实现基因抑制——对绿色荧光蛋白(GFP)和识别黄单胞菌外蛋白Q1(ROQ1)的抑制率分别高达76.5 ± 5.9%和76.1 ± 9.5%。并且没有明显的细胞毒性。
PEI-AuNCs对siRNA的负载效率和保护能力,通过凝胶成像进行了研究——
Cy3-DNA标记的PEI-AuNCs与植物细胞的关联程度及内化作用,通过荧光成像进行了研究——
PEI-AuNCs介导的siRNA递送对植物细胞基因抑制的效果,通过凝胶成像进行了研究——
VILBER Fusion FX7多功能成像系统
产品特点:
· 采用新一代深度制冷的CCD相机,暗电流0.0001e/p/s@-90℃, 制冷速度更快且寿命更长;
· F0.7超级镜头,大大提高了单位时间内的进光量,从而有效缩短曝光时间,尤其适用于Luc报告基因检测的生物发光成像;
· 荧光成像采用脉冲LED光源,7通道,激发强度比卤素灯更高。基于扫描方式,激发均一性≥99%;
· 全自动控制7位发射滤光片轮,搭载6个专用窄波滤光片,涵盖400~900nm,满足多种染料的检测需求;
· 配备小鼠专用恒温台兼容小鼠麻醉系统,通量可达5只小鼠。
应用范围:
· 小动物成像:基于生物发光或荧光的肿瘤发育、药物代谢、细胞迁移追踪、纳米材料研究等;
· 植物成像:LUC 或GFP、RFP等报告基因检测,转基因鉴定、基因互作、微生物侵染、植物发育、植物生物节律等;
· 化学发光 & 荧光Western blot,Northern blot或Southern blot;
· 免染胶,银染&考染蛋白胶,SSCP胶,培养皿(细胞或菌落),微孔板,蛋白芯片或其他基于荧光或化学发光的样品。